臺灣博碩士論文加值系統

中文摘要
牛樟芝是藥用真菌之一，其功效有治療食物中毒、腹痛、癌症、糖尿病及用在解毒、安眠等方面且具有有效的抗腫瘤活性。牛樟芝只生長於台灣特有的牛樟樹上，其子實體生長速度極為緩慢。因此，野生牛樟芝的來源取得不易，而利用液態深層發酵培養來進行生產，便可大量獲得牛樟芝的菌絲體及其代謝產物-多醣體。
本研究中利用各種的物理環境因子(例如，攪拌、接種量等)以及化學方法(培養基組成、其它化合物的添加)，探討牛樟芝菌絲球形成大小與多醣體產量的相關性。實驗發現，以B137此一菌種，菌體生長快及胞外多醣體含量高。接種量6%可得到最高的胞外多醣體含量，而檔板的使用，能促進胞外多醣體的生成。
此外，因添加物種類及濃度的不同，其對菌體生長或胞外多醣體生成之促進效果便有所不同；對菌絲球大小的影響上，大多數的添加物則會使得較小粒徑的菌絲球之比例增加，過大或過小粒徑的菌絲球均不利於多醣體的生成。實驗中，並設計以內部式可控制菌絲球粒徑之氣舉式反應器控制菌絲球大小來探討菌絲球大小與菌體生長及多醣體生成之相關性。

Abstract
Antrodia camphorata is one of the medicinal fungi that been widely used for the treatment of food intoxication, abdominal pain, diabetes, detoxification, and also has effective anticancer activity. The species is known only in Taiwan and is restricted to Cinnamomum kanehirai Hay, also endemic to Taiwan. Generally, it is becoming difficult to find A. camphorata in the forest because of its slow growing fruiting body. We develop submerged culture to gain a great deal of A. camohorata mycelia for its metabolite, polysaccharide.
In this study we tried and analyzed different physical factors, such as agitation, inoculation density etc. and various chemical factors, such as the components of medium and the relation between pellet sizes and production of polysaccharide by adding other compounds. The results showed that A. camphorata B137 grew faster and produce more extracellular polysaccharide. Inoculation density of 6% had the highest concentration of polysaccharide. The production of extracellular polysaccharide was improved by using baffles.
The results show differenr additives with different concentration have different effect to pellet growing and polysaccharide production. Most additives could higher the percentages of smaller pellets, but very small and very large pellets were not good for polysaccharide production. Finally, we tried to design new airlift bioreactor to control the pellet size and researched the influence of pellet size on cell growth and polysaccharide production.

目 錄
摘要………………………………………………………………………i
目錄……………………………………………………………………...iii
圖表目錄……………………………………………………………….viii
第一章 緒論…….………………………………………………………1
第二章 文獻回顧………………………………………………………3
一、牛樟芝的介紹……………………………………………………3
1.牛樟芝及其寄主-牛樟……………………………………………3
2.牛樟芝生物學上的分類…………………………………………..5
3.牛樟芝的顯微結構………………………………………………..6
4.牛樟芝的子實體…………………………………………………..7
二、牛樟芝的成分與組成……………………………………………...8
1.牛樟芝的一般成分………………………………………………..8
2.牛樟芝的糖類成分………………………………………………..8
3.牛樟芝的胺基酸組成……………………………………………..8
4.牛樟芝的脂肪酸………………………………………………..…8
5.牛樟芝的核苷酸成分…………………………………………..…9
6. 牛樟芝的揮發成分……………………………………….…...…9
7.牛樟芝的微量金屬成分…………………………………………..9
8.牛樟芝微量成分的結構……………………………….….……..10
三、牛樟芝的療效及其藥理學的研究……………………………….13
1.牛樟芝的民間療效………………………………………………13
2.牛樟芝經研究證實的具體藥效…………………………………13
3.牛樟芝的藥理學研究……………………………………………15
四、菇類多醣體……………………………………………………….17
1.多醣體抗腫瘤的作用機制………………………………………17
2.多醣體的分子量與結構…………………………………………19
3.多醣體的利用……………………………………………………20
五、牛樟芝的發酵培養……………………………………………….21
1.牛樟芝的固態與液態培養………………………………………21
1.1固態培養的相關研究……………………………………….21
1.2液態培養的相關研究……………………………………….22
1.3子實體、固態及液態發酵培養之比較……………………...24
2.液態發酵培養的影響因素………………………………………25
2.1絲狀微生物………………………………………………….25
2.2影響菌絲生長的因素……………………………………….27
3.發酵槽的使用……………………………………………………30
4.液態發酵培養的程序……………………………………………31
5.研究的動機與目的………………………………………………32
第三章 實驗材料與方法……………………………………………...33
一、實驗用菌株……………………………………………………….33
二、實驗藥品與儀器………………………………………………….33
1.實驗藥品…………………………………………………………33
2.實驗儀器…………………………………………………………34
三、組織分離………………………………………………………….34
四、繼代培養………………………………………………………….35
五、接種源及接種量………………………………………………….35
六、實驗測定與分析方法…………………………………………….35
1.菌體的測定………………………………………………………35
2.葡萄糖濃度的測定………………………………………………36
3.多醣體濃度的測定………………………………………………36
七、各種環境因子的影響…………………………………………….39
1.接種量對菌體大小及多醣體生成之相關性……………………39
2.檔板的使用對菌體大小及多醣體生成之相關性………………39
3.添加物對菌體大小及多醣體生成之相關性……………………39
4.不同添加物組合對菌體大小及多醣體生成之相關性…………40
八、氣舉反應器的發酵培養…………………………………………….41
1.外環式氣舉反應器……………………………………………....41
2.內環式氣舉反應器……………………………………………....42
第四章 實驗結果與討論……………………………………………...43
一、牛樟芝的組織分離……………………………………………….43
二、不同培養基對牛樟芝及其代謝產物的影響…………………….45
三、牛樟芝菌種的篩選……………………………………………….47
四、接種量對菌體大小及多醣體生成之相關性…………………….48
五、檔板對菌體大小及多醣體生成之相關性……………………….50
六、不同添加物對牛樟芝生長、菌體大小及多醣體生成的影響…...52
1.添加脂肪酸之影響…………………………………………………52
2.添加檸檬酸之影響………………………………………………....56
3.添加2,4-D之影響………………………………………………….58
4.添加椰子汁之影響………………………………………………....60
5.添加牛樟精油成分之影響………………………………………....62
6.添加植物油-橄欖油之影響………………………………………..65
7.添加界面活性劑之影響…………………………………………....67
8.添加對菌體及多醣體皆具促進效果之添加物的影響………....…73
9.添加具促進效果之添加物組合後的影響…………………………75
七、氣舉式反應器的發酵培養……………………………………….77
1.外環式氣舉反應器…………………………………………………77
2.內環式氣舉反應器…………………………………………………80
第五章 結論與未來展望……………………………………………...81
參考文獻………………………………………………………………...84
附錄……………………………………………………………………...95

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