臺灣博碩士論文加值系統

根據近幾年來的研究顯示，許多天然食材具有殺死癌細胞的功能，可能導因於這些食物本身含有抑制癌細胞成長或誘導癌細胞凋亡的成分存在。樟芝（Antrodia camphorata）的保肝及護肝療效在民間流傳甚久，本實驗研究主要是利用樟芝搭配數種有特定功效的食材，藉由固態培養及液態深層培養方式進行樟芝菌絲體之發酵，再以萃取所得之樟芝菌絲體、發酵液及基材同時進行腫瘤細胞株之測試，並觀察樟芝萃取物能否有效誘導癌細胞株進入細胞凋亡之途徑。結果發現食材經發酵後的萃取物比食材本身具有更強的抑殺腫瘤細胞能力，本研究亦發現不同食材發酵後的樟芝萃取物對不同腫瘤細胞的抑制能力也不同。低濃度的固態樟芝萃取物（0.4%）對腫瘤細胞即具有抑殺效果，相較之下，液態樟芝萃取物有效濃度需提高10倍以上，達4%以上方能具有相同效果，經由顯微鏡觀察顯示，其抑殺腫瘤細胞可能是經由細胞凋亡的機制來進行。這結果顯示天然食材經樟芝代謝後，可能產生一些具有腫瘤細胞毒性的化學物質，未來我們便可針對這些物質做更進一步的研究，以期待能找出新的抗癌藥物。

Recent studies demonstrated that many natural foods have ability to restrain tumor cells, because the compounds of these foods contained can inhibit the growth of human cancer cells or induce the death of cancer cells. The fruiting body of Antrodia camphorata are said to be effective in liver therapy in folklore. The aim of this study is to cultivate Antrodia camphorata mycelium with various natural foods by the solid-state and submerged fermentation, and then the extract of fermented mycelia, fermented broth and the foods are tested by MTT assay to investigate the effectiveness on cancer cells inhibition. The results showed that the alcohol extract of fermented food is more effective in suppressing the growth of cancer cells than the extract of foods. The extract of different fermented foods posses different degree of inhibition to human cancer cells proliferation. Low concentration（0.4%）extracts of A. camphorata by solid-state culturing can effectively inhibit the proliferation of different human cancer cells. In contrast, much higher extract concentrations of A.camphorata by submerged fermentation are needed to reach the same inhibition effect. From the microscopic observation, the extracts of A. camphorata by solid-state culture can induce tumor cell death by the mechanism seeming to similar to apoptosis. The results indicated that some natural foods metabolized by A. camphorata can produce cytotoxic compounds that are detrimental to tumor cells.

目次
中文摘要………………………………………………………..i
英文摘要……………………………………………………… ii
誌謝……………………………………………………………iii
第一章 前言………………………………………………… 1
第二章 文獻探討…………………………………………… 3
2.1 樟芝簡介……………………………………………5 2.2 食材簡介………………………………………………6
2.2.1 大蒜簡介……………………………………………6
2.2.2 絞股藍簡介…………………………………………8
2.2.3 香椿簡介…………………………………………10
2.2.4 亞麻籽簡介……………………………………12
2.2.5 山藥簡介……………………………………12
2.3 發酵製程簡介…………………………………………15
2.4 細胞凋亡………………………………………………19
第三章 研究目的…………………………………………24
第四章 材料與方法………………………………………25
4.1 實驗材料………………………………………………25
4.2 實驗方法………………………………………………26
4.2.1 液態培養製備……………………………………26
4.2.2 固態培養製備……………………………………26
4.2.3 食材製備…………………………………………26
4.2.4 細胞來源…………………………………………26
4.2.5 培養條件及細胞分盤……………………………27
4.2.6 細胞生長抑殺試驗（MTT assay）……………28
4.2.7 細胞存活率分析…………………………………29
4.2.8 HPLC定性分析…………………………………29
第五章 結果與討論……………………………………31
5.1 不同天然食材含量於液態樟芝發酵後的萃取物對人類癌細胞的影響…………………………………………31
5.1.2 液態發酵後的萃取物對人類肺癌細胞（A549 cells）不同作用時間的影響…………………………56
5.1.3 天然食材於液態樟芝發酵後的萃取物對人類癌細胞的細胞型態之影響………………………58
5.1.4天然食材與液態樟芝發酵後的萃取物對人類肺癌細胞A549 cells的細胞型態之動態變化圖……69
5.2 含天然食材之固態樟芝發酵萃取物對人類癌細胞之影響……………………………………………………76
5.2.2 固態發酵後的萃取物對人類肺癌細胞（A549 cells）不同作用時間的影響……………………………87
5.2.3 天然食材於固態樟芝發酵後的萃取物對人類癌細胞的細胞型態之影響……………………………89
5.2.4 含天然食材之固態樟芝發酵後的萃取物對人類肺癌細胞A549 cells的細胞型態之動態變化圖…103
5.3 HPLC分別對天然食材於樟芝發酵後的萃取物作一定性分析圖………….…………………………………121
第六章 結論……………………………………………124
第七章 參考文獻………………………………………126
附錄一……………………………………………………130

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