在中醫藥的典籍裡明確記載著部份真菌(菇蕈類)的子實體或菌絲體可以應用於食品及醫療保健上。樟芝（Antrodia camphorata）目前在學界、醫界越來越受注意，很多研究單位極力研發其保肝及抗癌方面的相關產品。另外國內外酒類的市場十分龐大，且國內民間盛行自釀藥酒方面也是多不勝數，如靈芝酒、靈芝啤酒均已上市。我們期望結合樟芝的功效與酒類的普及性，開發出新一代的保健飲品「樟芝酒」。本實驗為利用PDB和MY兩種培養基的樟芝液態菌絲發酵液，以酵母菌進行樟芝酒的釀造，將釀造好的兩類樟芝酒進行分析－包含酒精濃度、甲醇含量、抗氧化能力、對腫瘤細胞株以及正常細胞株影響並更進一步的餵食老齡老鼠主要探討對其免疫能力的影響。
研究顯示，各項功能性試驗結果MY樟芝酒皆較PDB樟芝酒為佳，MY樟芝酒顏色為澄清紅褐色，有濃郁的水果香氣，酒精濃度為11.2%(V/V)，甲醇含量為2.7ppm(以純乙醇計算)。 抗氧化能力，還原力方面，10%MY樟芝酒甲醇稀釋液的還原力相當於0.0168mg/ml的抗壞血酸；捕捉DPPH能力方面，8%MY樟芝酒甲醇稀釋液的捕捉DPPH能力相當於0.0131mg/ml的抗壞血酸。對於腫瘤細胞株影響，MY樟芝酒在濃度為10%時對人類肝癌細胞株(Hep 3B)有65%的抑殺率。在對正常細胞株的影響，MY樟芝酒在實驗濃度內對人類纖維母細胞株(LL4)及老鼠巨噬細胞株(RAW 264.7)沒有影響。
對老齡老鼠免疫能力的影響，經六週的餵食，老鼠脾臟經Con A刺激後其增生率分別為控制組28.65%、MY樟芝酒低劑量組32.19%、MY樟芝酒高劑量組126.25%、而脾臟內B cell和T cell的總合佔全部淋巴細胞的比率為控制組58.4%、MY樟芝酒低劑量組62.4%以及MY樟芝酒高劑量組65.9%。

Antrodia camphorata is a medicinal fugus only in Taiwan, it has been proved to posses liver protection and antitumor activities. It is our goal to make Antrodia camphorata wine by cultivating A.C.(Antrodia Camphorata) mycelia in two different media (PDB and MY) followed by introducing Yeast bacteria (Sacchomycese cerevisia) into the broth for further brewing process to produce MYAC(MY Antrodia camphorata) wine and PDBAC (PDB Antrodia camphorata)wine. The antioxidant capability, antitumor effects and immunological influence of MYAC wine and PDBAC wine were investigated.
The results showed that the antioxidant capability of 10% MYAC wine is equivalent to that of 0.0168 mg/ml ascorbic acid. 8% of MYAC wine is equivalent to 0.0131 mg/ml of ascorbic acid in capturing DPPH ability. 65% of inhibition rate of human liver cancer cell, Hep 3B, was found by 10% MYAC wine. As for the normal cell lines, MYAC wine has no apparent influence on the human fibroblastic cell line (LL4) and mouse marcophage cell line (RAW264.7). The immunological influence was examined by measuring the Con A stimulated spleen cell proliferation rate of aged mice after 6 weeks of oral adminstration of MYAC wine and PDBAC wine. The result indicated that MYAC wine can effectively increase the spleen cell proliferation rate in comparison with PDBAC wine and the control group. In each results of functional tests, MYAC wine is better than PDBAC wine.

第1章 緒論 1
第2章 文獻回顧 2
2.1 樟芝簡介 2
2.1.1 名稱 2
2.1.2 產地 2
2.1.3 型態與特色 2
2.1.4 起源與名間傳說 3
2.1.5 分類學 3
2.1.6 生理活性成分 3
2.1.7 功能研究（相關研究報告） 5
2.2 酵母菌簡介 7
2.2.1 分類 7
2.2.2 酵母菌的營養需求及生長的特徵 7
2.2.3 發酵的生化作用 8
2.2.4 發酵溫度 9
2.2.5 風味物質的生成 9
2.2.6 陳化作用 11
2.3 氧化壓力對人體之影響 11
2.3.1 氧化壓力對細胞所造成的影響 12
2.3.2 抗氧化劑作用的原理及機制 13
2.4 癌細胞生長與細胞凋亡 15
2.5 流式細胞技術（Flow cytometry） 16
第3章 實驗材料與實驗方法 18
3.1 實驗材料 18
3.1.1 藥品設備 18
3.1.2 設備 19
3.1.3 培養基配方 20
3.1.4 實驗用樟芝及酵母菌 20
3.1.5 實驗用細胞株 20
3.2 實驗方法 21
3.2.1 液態發酵培養樟芝深層發酵液 21
3.2.2 酵母菌製備及釀造樟芝酒 21
3.2.3 HPLC分析樟芝酒 21
3.2.4 GC檢測甲醇及乙醇含量 22
3.2.5 抗氧化能力 23
3.2.6 對腫瘤細胞株之影響 24
3.2.7 餵食老年小白鼠對其免疫能力及其他生理活性之影響 26
第4章 結果與討論 29
4.1 樟芝發酵液的製備 29
4.2 樟芝酒的製備 29
4.3 HPLC分析樟芝酒 29
4.4 GC檢測甲醇及乙醇含量 30
4.4.1 乙醇濃度 30
4.4.2 甲醇濃度 30
4.5 抗氧化能力 31
4.5.1 還原力 31
4.5.2 捕捉DPPH能力 32
4.6 樟芝酒對腫瘤細胞株之影響 33
4.6.1 對人類肺癌細胞株(A549)的影響 33
4.6.2 對人類肝癌細胞株(Hep 3B)的影響 33
4.6.3 對人類大腸癌細胞株(HCT-8)的影響 34
4.6.4 對人類纖維母細胞株(LL4)的影響(正常細胞株) 34
4.6.5 對老鼠巨噬細胞株(RAW264.7)的影響 34
4.7 餵食老年小白鼠對其免疫能力及其他生理活性之影響 35
4.7.1 實驗期間老鼠體重變化 35
4.7.2 餵食樟芝酒後生化指數差異 35
4.7.3 小鼠脾臟細胞增生測定 37
4.7.4 脾臟淋巴細胞之表面標記分析 37
第5章 結論 39
第6章 參考文獻 ……………………………………………………………..40
附表……………………………………………………………………………..45
附圖……………………………………………………………………………..53
附錄A…………………………………………………………………………..77
附錄B………………………………………………………………………...…83

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