臺灣博碩士論文加值系統

牛樟芝，學名Taiwanofungus camphoratus，為台灣特有種，只生長在台灣山區特有的牛樟樹樹幹腐朽之心材內壁，其子實體生長非常緩慢且稀少。近年來，牛樟芝已證實具有治療肝病及其他方面的功效，如抗腫瘤、抗氧化能力、抗病毒、抗發炎和降血糖。目前牛樟芝仍無法以人工栽培出子實體，而以固態培養和液態培養為主。本研究的主要目的為，人工栽培出子實體並測定其對肝癌細胞株(HepG2)之影響，希望藉由細胞測試結果更加證實此子實體具有與野生子實體相等的抑癌效果。將牛樟芝菌絲作機械傷害後，每天給予液態培養的mE菌(Burkholderia cepacia，以下簡稱為mE菌)滅菌液或二次水的刺激，並維持在20-28 °C飽和溼度的環境下，能使牛樟芝發展出厚且硬實菌絲結構，其甲醇萃取物在HPLC分析下，發現與野生子實體圖譜相似。以液態靜置培養兩個月後，液面會有漂浮的菌絲，此時給予牛樟木屑的水萃液刺激後，會使液面的菌絲產生類似菌孔的結構，但此結構不會持續的增厚，若給予氣體交換2週後，菌絲會生長密集，但菌孔卻消失，此結果指出生長環境中的空氣成分會影響其生長。將含有類似菌孔結構的菌絲經甲醇萃取，在HPLC分析下，其圖譜與菌絲相似。其次，以MEA固態培養牛樟芝菌絲，使其長期生長在密閉空間後，給予空氣的刺激，在適當的溫度溼度下，能使其產生孔狀結構，且經甲醇萃取，HPLC分析後，發現具有與牛樟芝野生子實體相似的波峰訊號，此乃證明經人工出菇操作，可成功培養出子實體。將培養出之子實體經不同溶劑萃取後，進行HPLC及TLC分析比較，發現具有與野生子實體相似的有效成分。將培養出之子實體萃取後，利用HepG2細胞測試其抑癌效果，結果顯示培養皿栽培之子實體具有較佳的抑癌效果。

Taiwanofungus camphoratus, a medical mushroom known only from Taiwan as ‘niu-chang chih’ or ‘jang-jy’. It is rare and expensive because it grows only on the inner heartwood wall of the endemic evergreen Cinnamonum kanehirai and is not easily cultivated. Recently, it has been used for treatment of liver diseases and other symptoms, such as anti-tumor, anti-oxidant ability, anti-virus, anti-inflammation and lowering the blood sugar. Any attempt failed to reproduce the fruiting body of Niu-chang chih by artificial cultivation, but successfully cultured by solid-state and submerge culture for the most part. The aim of this research is to investigate the formation of T.camphoratus fruiting bodies and to determine these effects on human hepatocellular carcinoma cell lines (HepG2). Mycelia was treated with mechanical methods including B. cepacia sterilized liquid culture or ddH2O under saturated humidity at 20-28 °C. The structure of mycelia was found thickly and compactly. From HPLC profile showed the methanol extracts of these mycelia were similar to the wild fruit bodies. With liquid cultured 2 months, mycelia floated on the culture medium. Addition of water extracts of C. kanehirai wood, the pore formation was observed on the surface of mycelia and was not extended in all surface. Exposure to air for 2 weeks, the mycelia grew intensively and the pore structures disappeared. These results indicate that the air content in the growth environment can influence mycelia growth. Again, HPLC profile showed the methanol extracts of these mycelia were similar to the mycelia. Cultured mycelia with MEA medium in airtight space were given air-shock for a certain time, the pore formation was found. The HPLC and TLC profiles showed the extracts of these mycelia were similar to the wild fruit bodies. Using HepG2 cell to test the inhibiting effects of fruit bodies, the result showed that these fruit bodies had the cancer- inhibition effects. This result demonstrates that cancer-inhibition effect of the artificial fruiting bodies is close to the wild fruiting bodies.

摘要-----------------------------------------------------------------------------------Ⅰ
Abstract-------------------------------------------------------------------------------Ⅲ
目錄-----------------------------------------------------------------------------------Ⅴ
圖目錄--------------------------------------------------------------------------------Ⅸ
表目錄------------------------------------------------------------------------------XIII壹、前言--------------------------------------------------------------------------------1
貳、文獻回顧------------------------------------------------------------------------- 3
一、牛樟芝簡介--------------------------------------------------------------------3
二、牛樟芝生理活性功能--------------------------------------------------------5
(一)、抗氧化能力---------------------------------------------------------------6
(二)、保肝功能------------------------------------------------------------------7
(三)、抑菌及抗病毒能力------------------------------------------------------7
(四)、增強免疫力---------------------------------------------------------------8
(五)、抗腫瘤能力---------------------------------------------------------------8
(六)、預防心血管疾病及降血糖之相關研究----------------------------10
(七)、活體動物試驗上-------------------------------------------------------10
三、牛樟芝成分分析------------------------------------------------------------10
(一)、多醣體 (polysaccharides)---------------------------------------------11
(二)、三萜類化合物 (triterpenoids)----------------------------------------12
(三)、菌絲體與子實體成分比較-------------------------------------------14
四、牛樟芝的安全性------------------------------------------------------------17
參、目的------------------------------------------------------------------------------19
肆、MEA固態培養出菇測試-----------------------------------------------------21
一、簡介---------------------------------------------------------------------------21
二、實驗材料、儀器--------------------------------------------------------------21
三、實驗方法---------------------------------------------------------------------22
(一)、MEA固態牛樟芝菌絲培養------------------------------------------22
(二)、PDA培養mE菌--------------------------------------------------------22
(三)、出菇測試----------------------------------------------------------------22
(四)、HPLC圖譜積分面積算法--------------------------------------------23
四、結果與討論------------------------------------------------------------------23
(一)、溫度及溼度的影響----------------------------------------------------23
(二)、刺激物的添加方式----------------------------------------------------24
(三)、刺激物的影響----------------------------------------------------------25
伍、MEB液態培養出菇測試-----------------------------------------------------35
一、簡介---------------------------------------------------------------------------35
二、實驗材料、儀器------------------------------------------------------------35
三、實驗方法---------------------------------------------------------------------35
四、結果與討論------------------------------------------------------------------36
陸、MEA固態培養air-shock測試-----------------------------------------------45
一、簡介---------------------------------------------------------------------------45
二、實驗材料、儀器--------------------------------------------------------------45
三、實驗方法---------------------------------------------------------------------45
(一)、MEA固態牛樟芝菌絲培養------------------------------------------45
(二)、air-shock出菇測試-----------------------------------------------------46
四、結果與討論------------------------------------------------------------------46
柒、HPLC分析----------------------------------------------------------------------53
一、簡介---------------------------------------------------------------------------53
二、實驗材料、儀器--------------------------------------------------------------53
三、實驗方法---------------------------------------------------------------------53
(一)、萃取方法----------------------------------------------------------------53
(二)、HPLC分析--------------------------------------------------------------54
四、結果與討論------------------------------------------------------------------55
捌、TLC分析-----------------------------------------------------------------------57
一、簡介---------------------------------------------------------------------------57
二、實驗材料、儀器--------------------------------------------------------------57
三、實驗方法---------------------------------------------------------------------57
(一)、萃取方法----------------------------------------------------------------57
(二)、TLC分析----------------------------------------------------------------58
四、結果與討論------------------------------------------------------------------58
捌、細胞培養與測試---------------------------------------------------------------61
一、簡介---------------------------------------------------------------------------61
二、實驗材料、儀器--------------------------------------------------------------61
三、實驗方法---------------------------------------------------------------------62
(一)、細胞培養----------------------------------------------------------------62
(三)、細胞測試----------------------------------------------------------------65
四、結果與討論------------------------------------------------------------------66
拾、討論------------------------------------------------------------------------------71
結論-----------------------------------------------------------------------------------75
參考文獻-----------------------------------------------------------------------------77
附錄-----------------------------------------------------------------------------------85
圖1-1 分子學系統樹顯示牛樟芝並非屬於Antrodia，也非屬於其他相近屬------------------------------------------------------------------------------4
圖1-2 具抗腫瘤活性的β-(1-6)分枝的β-(1-3)-D-葡聚醣化學結構-------11
圖1-3 具抗腫瘤活性的β-(1-6)分枝的β-(1-3)-D-葡聚醣三股螺蜁結晶構形(以X-ray衍射)----------------------------------------------------------12
圖1-4 Structures of fourteen compounds isolated from the fruit-body of Antrodia camphorate------------------------------------------------------13
圖1-5 Neuroprotective diterpenes from the fruiting body of Antrodia camphorat-------------------------------------------------------------------14
圖4-1 MEA固態牛樟芝菌絲培養-----------------------------------------------27
圖4-2 B. cepacia在PDA上的生長情形----------------------------------------27
圖4-3溫度與溼度之影響---------------------------------------------------------28
圖4-4 牛樟芝(左)與Burkholderia cepacia (右)共同培養-------------------29
圖4-5 以300 ml mE菌液加100 ml水配製MEA培養牛樟芝-------------29
圖4-6 添加A組刺激物培養三個月後及經甲醇萃取，HPLC分析後與野生子實體之比較圖譜-----------------------------------------------------30
圖4-7 添加B組刺激物培養三個月後及經甲醇萃取，HPLC分析後與
野生子實體之比較圖-----------------------------------------------------31
圖4-8 添加C組刺激物培養三個月後及經甲醇萃取，HPLC分析後與
野生子實體之比較圖譜--------------------------------------------------32
圖4-9 添加D組刺激物培養三個月後及經甲醇萃取，HPLC分析後與野生子實體之比較圖譜-----------------------------------------------------33
圖4-10 實驗組與野生子實體菌絲體之綜合比較圖------------------------34
圖5-1 培養初期有添加牛樟木屑水萃液(左)和無添加牛樟木屑水萃液
(右)比較圖------------------------------------------------------------------38
圖5-2 MEB液態牛樟芝菌絲搖瓶培養-----------------------------------------38
圖5-3 實驗組(大錐4)的孔狀----------------------------------------------------38
圖5-4實驗組(燒杯3)菌孔結構漂浮於液面的菌絲--------------------------39
圖5-5實驗組(小錐14)類似菌孔的結構----------------------------------------39
圖5-6實驗組(小錐9)類似菌孔的結構-----------------------------------------39
圖5-7實驗組(小錐14)給予適當氣體交換14天後，菌絲生長密集但菌孔
消失--------------------------------------------------------------------------40
圖5-8實驗組(小錐19)給予適當氣體交換14天後，菌絲生長密集但菌孔
消失--------------------------------------------------------------------------40
圖5-9實驗組(大錐6)給予適當氣體交換14天後，菌絲生長密集---------41
圖5-10實驗組(大錐9)給予適當氣體交換14天後，菌絲生長密集-------41
圖5-11實驗組(大錐10)給予適當氣體交換14天後，菌絲生長密集------41
圖5-12實驗組(燒杯3)含類似菌孔的菌絲，經甲醇萃取，HPLC分析後之圖譜---------------------------------------------------------------------42
圖5-13實驗組(大錐4)含類似菌孔的菌絲，經甲醇萃取，HPLC分析後之圖譜---------------------------------------------------------------------42
圖5-14實驗組(小錐14)含類似菌孔的菌絲較黃薄的部分，經甲醇萃取，HPLC分析後之圖譜----------------------------------------------------43
圖5-15實驗組(小錐14)含類似菌孔的菌絲較紅厚的部分，經甲醇萃取，HPLC分析後之圖譜------------------------------------------------------43
圖5-16實驗組與野生子實體菌絲體之綜合比較圖--------------------------44
圖6-1 孔狀結構---F1--------------------------------------------------------------48
圖6-2 孔狀結構---F2--------------------------------------------------------------48
圖6-3 孔狀結構---F3--------------------------------------------------------------49
圖6-4 孔狀結構---F4--------------------------------------------------------------49
圖6-5實驗組F1孔狀結構，經甲醇萃取，HPLC分析後與野生子實體之
比較圖譜--------------------------------------------------------------------50
圖6-6實驗組F2孔狀結構，經甲醇萃取，HPLC分析後與野生子實體之比較圖譜--------------------------------------------------------------------50
圖6-7實驗組F3孔狀結構，經甲醇萃取，HPLC分析後與野生子實體之比較圖譜--------------------------------------------------------------------51
圖6-8實驗組F4孔狀結構，經甲醇萃取，HPLC分析後與野生子實體之比較圖譜--------------------------------------------------------------------51
圖6-9與野生子實體菌絲體之綜合比較圖------------------------------------52
圖6-10畫紅線處為去除parafilm， 使只有紅線區的菌絲受到空氣的刺激，進而發展出孔狀結構------------------------------------------------52
圖7-1 實驗組以不同溶劑萃取，HPLC 分析後，與野生子實體之比較圖譜-----------------------------------------------------------------------------55
圖7-2 S廠商以不同溶劑萃取，HPLC 分析後，與野生子實體之比較圖譜-----------------------------------------------------------------------------56
圖7-3 松杉靈芝以不同溶劑萃取，HPLC 分析後，與野生子實體之比較圖譜--------------------------------------------------------------------------56
圖8-1 樣品以不同溶劑萃取，TLC分析後之比較圖------------------------60
圖9-1 野生子實體不同溶劑萃取物，對肝癌細胞的細胞抑制率---------68
圖9-2 實驗組子實體不同溶劑萃取物，對肝癌細胞的細胞抑制率------68
圖9-3 S廠商不同溶劑萃取物，對肝癌細胞的細胞抑制率-----------------69
圖9-4 靈芝不同溶劑萃取物，對肝癌細胞的細胞抑制率------------------69
表1-1 牛樟芝一般成分分析-----------------------------------------------------15
表1-2 牛樟芝微量金屬含量分析-----------------------------------------------16
表1-3 牛樟芝胺基酸組成分析--------------------------------------------------17
表4-1 A、B、C、D四組再生菌絲外觀、刺激物和積分面積比較圖---------34

Breene, W.M. 1990. Nutritional and medical value of specialty
mushrooms. J. Food Prot. 53, 883-894.
Chang, T.T., Chou, W.N. 1995. Antrodia cinnamomea sp. nov. on
Cinnamomum kanehirai in Taiwan. Mycol. Res. 99, 756-758.
Chang, H.L., Chao, G.R., Chen, C.C., Mau, J.L. 2001. Non-volatile taste
components of Agaricus blazei, Antrodia camphorate and
Cordyceps militaris mycelia. Food chem. 74, 203-207.
Chang, T.T., Chou, W.N. 2004. Antrodia cinnamomea reconsidered and
A. salmonea sp. nov. on Cunninghamia konishii in Taiwan. Bot. Bull. Acad. Sin. 45, 347-352.
Chen, C.H. Yang, S.W. 1995. New steroid acids from Antrodia
cinnamomea, a fungal parasite of Cinnamomum micranthum.
J. Nat. Prod. 58, 1655-166.
Chen, J.C., Lin, W.H., Chen, C.N., Sheu, S.J., Huang, S.J., Chen, Y.L.
2001. Development of Antrodia camphorata mycelium with
submerge culture. Fung Sci. 16, 7-22.
Chen, C.C., Shiao, Y.J., Lin, R.D., Shao, Y.Y., Lai, M.N., Lin, C.C., Ng,
L.T., Kao, Y.H. 2006. Neuroprotective diterpenes from the fruiting
body of Antrodia camphorata. J. Nat. Prod. 69, 689-691.
Cherng, I.H., Chiang, H.C. 1995. Three new triterpenoids from Antrodia
cinnamomea. J. Nat. Prod. 58, 365-371.
Cherng, I.H., Wu, D.P., Chiang, H.C. 1996. Triterpenoids from Antrodia
cinnamomea. Phytochemistry. 41, 263-267.
Chiang, H.C., Wu, D., Cherng, I.W. Ueng, C.H. 1995. A sesquiterpene
lactone, phenyl and biphenyl compounds from Antrodia cinnamomea. Phytochemistry. 39, 613-616.
Crisan, E.V., Sands, A. 1978. Nutritional value. In the biology and
cultivation of Edible mushrooms. Eds Chang, S.T. and Hayes, W.A., 137-165. Academic Press. New York.
Deslandes, Y., Marchessault, R.H., Sarko, A. 1980. Triple-helical
structure of (1-3)-beta-D-glucan. Macromolecules. 13, 1466-1471.
Hawksworth, D.L., Kirk, P.M., Sutton B.C., Pegler, D.N. 1996.
Dictionary of the fungi. Intertnational Mycological Institute.
Hseu, Y.C., Chang, W.C., Hseu, Y.T., Lee, C.Y., Yech, Y.J., Chen, P.C.,
Chen, J.Y., Yang, H.L. 2002. Protection of oxidative damage by
aqueous extract from Antrodia camphorata mycelia in normal
human erythrocytes. Life Sci. 71, 469-482.
Hsu, Y.L., Kuo, Y.C., Kuo, P.L., Ng, L.T., Kuo, Y.H., Lin, C.C. 2005.
Apoptotic effects of extract from Antrodia camphorata fruiting
bodies in human hepatocellular carcinoma cell lines. Cancer Lett.
221, 77-89.
Huang, L.C., Huang, S.J., Chen, C.C., Mau, J.L. 1999. Antioxidant
properties of Antrodia camphorata. Proceedings of 3rd International
Conference on Mushroom Biology & Mushroom Products. 275-283.
Kuo, P.L., Hsu, Y.L., Cho, C.Y., Ng, L.T., Kuo, Y.H., Lin, C.C. 2006.
Apoptotic effects of Antrodia cinnamomea fruiting bodies extract are
mediated through calcium and calpain-dependent pathways in Hep
3B cells. Food Chem. Toxicol. 44, 1316-1326.

Lee, I.H., Huang, R.L., Chen, C.T., Chen, H.C., Hsu, W.C., Lu, M.K.
2002. Antrodia camphorata polysaccharides exhibit anti-hepatitis B
virus effects. FEMS Microbiol. Lett. 209, 63-67.
Liu, J.J., Huang, T.S., Hsu, M.L., Chen, C.C., Lin, W.S., Lu, F.J. 2004.
Antitumor effects of the partially purifed polysaccharides from
Antrodia camphorate and the mechanism of its action. Toxicol. Appl. Pharmacol. 201, 186-193.
Mizuno, T., Saito, H., Nishitoba, T., Kawagishi, H. 1995. Antitumor-
active substances from mushrooms. Food Rev. Int. 11, 23-61.
Shen, C.C., Kuo, Y.C., Huang, R.L., Lin, L.C., Don, M.J., Chang, T.T.,
Chou, C.J. 2003. New ergostane and lanostane from Antrodia
camphorate. J. Chin. Med. 14, 247-258.
Shen, Y.C., Wang, Y.H., Chou, Y.C., Chen, C.F., Lin, L.C., Chang, T.T.,
Tien, J.H., Chou, C.J. 2004. Evaluation of the Anti-inflammatory
activity of zhankuic acids isolated from the fruiting bodies of Antrodia camphorata. Planta Med. 70, 310-314.
Wu, S.H., Ryvarden, L., Chang, T.T. 1997. Antrodia camphorata
(“niu-chang-chih”), new combination of a medicnal fungus in
Taiwan. Bot. Bull. Acad. Sin. 38, 273-275.
Wu, S.H., Yu, Z.H., Dai, Y.C., Chen, C.T., Su, C.H., Chen, L.C., Hsu,
W.C., Hwang, G.Y. 2004. Taiwanofungus, a polypore new genus.
Fung Sci. 19, 109-116.
Yang, S.W., Shen, Y.C., Chen, C.H. 1996. Steroids and triterpenoids of
Antrodia cinnamomea – a fungus parasitic on Cinnamomum
micranthum. Phytochemistry 41, 1389-1392.
Yoshiiyuki, M., Linda, H., Toyofumi, Y., Masaharu, T., Fumio, S.,
Mineo, S., Akio, M., Shonen, Y., Kengo, S. 1998. A mushroom
fruiting body-inducing substance inhibits activities of replicative
DNA polymerases. Biochem. Biophys. Res. Commun. 249, 17-22.
Zang, M., Su, C.H. 1990. Ganoderma comphoratum, a new taxon in
genus Ganoderma from Taiwan, China. Acta Bot. Yunnancia 12, 395-396.
Zhang, J., Wang, G., Li, H., Zhuang, C., Mizuno, T., lto, H., Suzuki, C.,
Okamoto, H., Li, J. 1994. Antitumor polysaccharides from a
Chinese mushroom “Yuhuangmo”, the fruiting body of Pleurotus
citrinopileatus. Biosci. Biotech. Biochem. 58, 1195-1201.
臧穆、蘇慶華 (1990) 我國臺灣產靈芝屬一新種—樟芝。雲南植物研
究。12(4):395-396。
楊書威 (1991) 中藥樟菇活性成分之研究。國立台灣大學 藥學研究
所碩士論文
高曉薇 (1992) 臺灣靈芝屬新種樟芝之三萜類成分研究。臺北醫學院
天然物醫物研究所碩士論文。
程一華 (1994) 樟芝之成分研究。國立臺灣師範大學 化學研究所碩
士論文。
吳德鵬 (1995) 樟芝微量成份的研究。國立臺灣師範大學 化學研究
所碩士論文。
簡秋源、姜宏哲、陳淑貞 (1997) 牛樟菇培養性狀及其三帖類成分分析之研究。牛樟生物學及育林技術研討會論文集。林業叢刊第72號，133-137
廖英明 (1998) 菇類中的許不了~樟芝。農業世界雜誌。176:76-79
王如文、郭曼延、陳清農、陳勁初 (1999) 樟芝子實體及菌絲體金屬含量分析之研究。中國農業化學會第三十七次會員大會。
水野卓、川合正允 (1999) 菇類的化學、生化學。賴慶亮譯國立編譯館。
黃惟敏 (1999) 樟芝微量成份的研究。靜宜大學 應用化學研究所碩
士論文。
黃坤正、丁懷謙、余俊強、何漣漪 (2000) 基因毒理與動物病理組織之系統分析，依「食品新興製造系統整合及關鍵技術發四年計劃(第四年度)」計劃標號：007051-04:3-12。
沈立言 (2000) 牛樟芝菌絲體發酵萃取液對肝臟生理機能性之影響。89年度保健食品研究開發計畫心得發表會 p.191-198.
黃鈴娟 (2000) 樟芝與姬松茸之抗氧化性質及其多醣組成分析。國立中興大學食品科學研究所碩士論文
呂鋒洲、陳勁初 (2001) 靈芝之王：台灣樟芝。元氣齋出版社。
林金鑫、許勝傑、陳勁初、陳建志、李金木、曾盛陽 (2001a) 樟芝與姬松茸菌絲體之免疫功能分析。保健食品科技與發展國際研討會(上海)。
林金鑫、曾虹萍、陳勁初、蔡明憲、楊明芬、陳巧文 (2001b) 大鼠致畸測一樟芝發酵原液凍乾成品。中華保健食品學會第二屆第一次會員大會。
許勝傑、鍾煒惠、陳勁初、蔡明憲、王聖耀、蔡慶龍、陳巧文 (2001)大白鼠口服高劑量樟芝菌絲體之急性毒性試驗中華保健食品學會第二屆第一次會員大會。
張中姿、陳俊憲、林文鑫、陳勁初、呂鋒洲 (2001) 中華民國食品科
學技術學會。第三十二次(第十六屆第一次)會員大會手冊 p.265
陳建志、陳勁初、陳清農、許勝傑、曾虹萍、盛莉莎 (2001a) 樟芝菌絲體對B型肝炎病毒表面抗原及e抗原之活性檢測。中華民國食品科學技術學會第三十一次會員大會論文摘要。
陳清農、林文鑫、盛莉莎、黃仕政、陳勁初、劉宗榮 (2001b) 樟芝對Sprague-Dawley大白鼠之連續投藥口服急性毒性。中華保健食品學會第二屆第一次會員大會。
陳勁初、陳建州、張基煌、毛正倫、喬長誠 (2001c) CCRC36396姬松茸與樟芝菌絲體之毒性與致突變性之研究。中華保健食品學會第二屆第一次會員大會。
蔡明憲，王聖耀，蔡慶龍，陳巧文，許勝傑，鍾煒惠，陳勁初 (2001) 大白鼠口服高劑量樟芝菌絲體之急性毒性試驗。中華保健食品學會第二屆第一次年會壁報論文摘要。
戴宇昀 (2001) 樟芝菌絲體與子實體對四氯化碳及酒精誘導之慢性及急性肝損傷之保肝功能評估。國立中興大學 食品科學系研究所碩士論文。
劉宗榮、陳清農、林文鑫、盛莉莎、黃仕政、陳勁初 (2001) 樟芝對Sprague-Dawley大白鼠之連續投藥口服急性毒性。中國保健食品學會第二屆第一次年會壁報論文摘要
嚴貴榮 (2001) 樟芝對STZ誘發高血糖鼠血糖調節與抗氧化之影響。輔仁大學 食品營養學系碩士論文
劉俊仁1 (2002) 中草藥抗癌機制研究:(壹):黃芩素及黃芩苷對血管新生作用之影響及其機制探討;(貳):樟芝活性多醣體之生物活性分析及其經由免疫調節抑制腫瘤生長之研究。國立臺灣大學 生物化學暨分子生物學研究所博士論文。
劉翠玲2 (2002) 樟芝對倉鼠體內脂質代謝與抗氧化狀態之影響。輔仁大學 食品營養學系碩士論文。
陳怡欣1 (2002) 牛樟芝發酵過濾液對大白鼠肝臟生理機能之影響。中國醫藥學院 營養研究所碩士論文。
陳秀雯2、陳清農、黃仕政、許勝傑、曾虹萍、洪鳴遠、傅麒玲、陳勁初 (2002) 樟芝菌絲體之免疫調節功能評估. 中華民國食品科學技術學會. 第三十二次(第十六屆第二次)會員大會手冊 p. 326
馬良瑩 (2002) 牛樟芝醱酵過濾液對人體肝臟機能與健康狀況之影響。國立中興大學 生命科學院碩士論文。
賴宏亮、呂美津、陳武元、莊秀琪 ( 2002) 樟芝免疫調節活性之研究. 台灣保健食品學會. 第二屆第二次年會. 大會議程及壁報論文摘要。p. 49.
呂鋒洲 (2002) 牛樟芝各抗腫瘤有效成分的分離、純化，誘發腫瘤凋亡及其作用機轉的研究. 九十一年度保健食品研究開發計畫成果發表會. p.13-16.
蘇慶華 (2002) 健康的守護神-國寶樟芝。愛克思文化事業有限公司。台灣。
宋祖瑩 (2003) 樟芝深層培養液抗氧化及抗腫瘤特性之研究。國立中興大學 食品科學系博士論文。
蘇娟娟 (2003) 米酒槽蛋白質對人類真皮層纖繀母細胞生長的影響
。國立東華大學 生物技術研究所碩士論文。
林志遠 (2005) 牛樟芝子實體形成之探討。國立東華大學 生物技術研究所碩士論文。
吳嘉興 (2006) 助益菌對樟芝液態發酵多醣產率之影響。國立東華大學 生物技術研究所碩士論文。