原生質體融合技術應用在食用菌的育種時，具有突破傳統方法異種間不能交配的優
點；靈芝是中國傳統珍貴藥材，含多種具生理活性成分，但大量栽培時的污染亦不
容忽視，因此本文以異種靈芝〔靈芝Ganoderma lucidum, 松杉靈芝G. tsugae〕進
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行原生質體融合期望能減低污染並提高藥用價值。
實驗中製備原生質體最適條件乃以液態靈芝完全培養基振盪培養４天的菌體，以
Novozym 234 (10 mg/ml)溶於含0.6M 蔗糖的0.02M磷酸緩衝液，振盪作用３小時；
經過濾，1000rpm 離心15分鐘，以0.6M蔗糖溶液懸浮之。另外亦嘗試以菌絲片段來
接種，除節省酵素用量外，尚可增加酵素作用面積，提高產量達原來的一倍以上（
＞６×１０6 個／ml）。經再生培養７天，靈芝最高再生率達2.8 ﹪，松杉靈芝23
﹪。
進行融合時，兩種原生質體等量混合於含0.05M 氯化鈣的30﹪PEG6000 溶液，靜置
30分鐘後行再生培養，同時以溫度或抑制劑作為再生培養限制非融合株生長的培養
條件，以減化篩選融合株的工作，結果在37℃下篩選出３株菌，在菌株不斷形成扇
形面的情況下，目前共計15株菌經菌絲與菌落形態觀察，不同溫度下的生長速率，
與親代菌絲之親和性反應，漆氧化酵素活性分析，及限制酵素水解基因片段多型性
圖譜的鑑定，確定15株融合菌株兼具親代雙方的特性，顯示異種間的原生質體融合
確為可行。