臺灣博碩士論文加值系統

本研究的主要目的在於探討以三角瓶液態培養方式進行樟芝(Antrodia cinnamomea CCRC35396)菌絲生長及抗氧化成分生成之影響，希望藉由培養基組成、外在培養環境及牛樟樹屑萃出液的添加，以提高樟芝菌絲體產量及抗氧化成分之生成，最後探討甲醇提取溫度及提取時間對樟芝菌絲體萃出物抗氧化成分抽出效果之影響。
實驗結果顯示，於培養組成為蔗糖 3%、yeast extract 1.5%、peptone 0.4%、K2HPO4、KH2PO4及MgSO4．7H2O各 0.05%、溫度 25℃、初始pH值 4.5、轉速 100rpm下培養7天可得樟芝菌體乾重986.70mg/100mL，並以溫度30℃下提取24小時可得43.15﹪的DPPH自由基掃除活性，及49.50﹪抗氧化活性。另於實驗中添加牛樟樹屑萃取液可促進樟芝之生長及抗氧化成分生成，且隨添加量之增加生長愈好。
在甲醇提取溫度影響方面，隨著提取溫度增加其萃出物之DPPH自由基掃除活性及抗氧化性質明顯增加，於提取溫度為70℃下約8小時可將樟芝菌絲體中大部分抗氧化成份抽出，且萃出物之DPPH自由基掃除活性及抗氧化活性分別為90.83%及87.76﹪。

The main objective of this research is to study the effect of cultural conditions on the mycelia production and the formation of antioxidant component in submerged culture of Antrodia cinnamomea CCRC35396. Moreover, the optimal temperature and time for the methanol leaching of antioxidant component was also determined.
The results show that sucrose of 3%, yeast extract of 1.5%, peptone of 0.4%, K2HPO4 of 0.05%, KH2PO4 of 0.05%, MgSO4 of 0.05% at temperature of 25℃, initial pH of 4.5 and rotary speed of 100rpm were in favor of the formation of antioxidant component. Under the conditions, the cell dry weight, DPPH radical scavenging activity and antioxidant activity by leaching operation at 30℃ & 24 hours reached 986.70 mg/100mL, 43.15% and 49.05%, respectively in a 7-days culture. Raffinate from Cinnamomum kanehirae could promote the growth and antioxidant component of Antrodia cinnamomea, and the effect was dosage dependent.
Concerning the optimal temperature for methanol leaching, leaching effect increased with the operating temperature. Most of the antioxidant compound of Antrodia cinnamomea could be obtained at the operating temperature of 70℃ in 8 hours, and raffinate also showed 90.83%, 87.76% toward DPPH radical scavenging activity and antioxidant activity, respectively.

誌 謝…………………………………………………………………I
中文摘要…………………………………………………………………Ⅱ
英文摘要…………………………………………………………………Ⅲ
目 錄…………………………………………………………………IV
圖 目 錄…………………………………………………………………VII
表 目 錄…………………………………………………………………IX
第一章 緒論……………………………………………………………1
1—1 前言………………………………………………………………1
1—2 本文大綱…………………………………………………………2
第二章 文獻回顧………………………………………………………3
2—1 樟芝的介紹……………………………………………………3
2—1—1 樟芝的型態及分布……………………………………3
2—1—2 樟芝的分類……………………………………………4
2—1—3 樟芝的成分分析………………………………………6
2－1－4 樟芝成分的生理活性試驗……………………………10
2—2 深層培養的環境影響因素…………………………………12
2—2—1 物理因素………………………………………………12
2—2—2 化學因素………………………………………………13
2—3 抗氧化性質……………………………………………………17
2—3—1 脂質自氧化反應………………………………………17
2—3—2 抗氧化劑………………………………………………19
2—4 菇類多醣的介紹………………………………………………24
第三章 實驗材料與分析方法………………………………………29
3—1 菌株……………………………………………………………29
3—2 實驗藥品………………………………………………………30
3—3 實驗儀器及設備………………………………………………32
3—4 分析方法………………………………………………………33
3—4—1 pH值測定………………………………………………………33
3—4—2菌體乾重測定……………………………………………………33
3—4—3胞外多醣測定……………………………………………………33
3—4—4甲醇萃出物之製備………………………………………………33
3—4—5抗氧化活性測定…………………………………………………34
3—4—6捕捉α,α- diphenyl -β- picrylhydrazyl (DPPH)
自由基能力之測定………………………………………………34
3—5攪拌式反應器…………………………………………………………35
第四章 實驗方法……………………………………………………36
4—1試管斜面培養………………………………………………………36
4—2培養皿平面培養……………………………………………………37
4—3基礎液態培養基組成………………………………………………38
4—4種菌與接菌量………………………………………………………39
4—5菌絲切割器製作……………………………………………………40
4—6菌種篩選……………………………………………………………41
4—7利用不同培養基組成取代原基礎液態培養基試驗………………42
4—8探討添加物質對樟芝菌絲體生長及抗氧化成分之影響…………51
4—9提取條件對樟芝菌絲體萃出物抗氧化成分之影響………………55
4－10發酵槽培養試驗……………………………………………………58
第五章 結果與討論……………………………………………………60
5—1 菌種篩選……………………………………………………………60
5—2 利用不同培養基組成取代原基礎液態培養基試驗………………62
5—3 探討添加物質對樟芝菌絲體生長及抗氧化成分之影響…………89
5—4 提取條件對樟芝菌絲體萃出物抗氧化成分之影響………………101
5－5 發酵槽培養試驗……………………………………………………107
第六章 結論與展望……………………………………………………111
6—1 結論…………………………………………………………………111
6—2 未來展望……………………………………………………………113
參考文獻……………………………………………………………………115
附錄A………………………………………………………………………119
簡歷…………………………………………………………………………121

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