臺灣博碩士論文加值系統

由於染髮劑常用的中間體PPD(p-phenylenediamine)，是目前公認有刺激致癌爭議的成份，而PAP(p-Aminophenol)、TDS(Toluene-2,5-diamine sulfate)是現今市售染髮劑中常用來取代PPD成份，因此本實驗將PAP、TDS及2M5AP(2-Methyl-5-amino phenol)這三種原料做為本實驗自配染髮劑中的主要研究成份，利用本實驗開發的HPLC方法進行定量及安定試驗。
本研究所建立的HPLC分析方法，其管柱為HYPERSIL ODS-C18（5μm，4.6 mm × 250 mm），移動相組成為乙腈：三乙胺（以磷酸調pH7.5）=10：90，流速為1.0 ml∕min，注入量為10μL，波長為 245 nm偵測PPD(
pphenylenediamine)、PAP(p-aminophenol)、TDS(Toluene-2,5-diamine sulfate)、MAP(m-aminophenol)、OAP(o-aminophenol)及2M5AP(2-Methyl-5-amino phenol)六個成份而波長272 nm偵測RL(resorcinol) 一個成份，可在20分鐘內可同時分析七個常見染髮劑成份。
在安定性試驗結果中，測試在自製的永久性氧化型染髮劑其中含6.5%抗氧化劑Na2SO3，在25℃室溫條件下放置一個月， PAP、TDS及2M5AP含量分別為83.7%、94.2%及73.7%。
在分析方法確效的虐待試驗中，只有加酸、加H2O2或照射UV對主成份PAP、TDS及2M5AP不會造成太大的影響，含量都有88.5%以上；而加鹼下對PAP和2M5AP都有影響，含量分別下降至37.2﹪及67.1%，而在加熱下僅對PAP有影響，含量剩62.4%。

As commonly used hair dye intermediates, PPD(p-phenylenediamine) is now recognized as a controversial ingredients due to stimulus and carcinogen. At present, PAP(p-Aminophenol) and TDS(Toluene-2,5-diamine sulfate) are commercially available in hair dye used to replace PPD component. Therefore, PAP, TDS and 2M5AP(2-Methyl-5-amino phenol) were the main ingredients in our self-made hair dye during this research. The HPLC method was developed to assay the contents of the ingredients and to carry out the stability test of formula.
The developed HPLC method was performed with the conditions: column (Hypersil ODS-C18; 5μm; 4.6 mm × 250mm), mobile phase (acetonitrile : 1﹪triethylamine pH7.5 buffer＝10: 90), detection wavelelngth 245 nm for PPD (p-phenylenediamine), PAP (p-aminophenol), TDS (Toluene-2 ,5-diamine sulfate), MAP (m-aminophenol), OAP (o-aminophenol) and 2M5AP (2-Methyl-5-amino phenol) as well as 272 nm for RL (resorcinol), flow rate 1.0 ml/min, injection amount 10μL, and the run time was within 20 minutes to simultaneously analyze seven common ingredients of hair dyes.
In the stability tests, 6.5 % of antioxidant Na2SO3 was added to the formula of our self-made permanent hair dyes. This formula showed the satisfied results with the 83.7% contents of PAP、94.2% contents of TDS and 73.7% contents of 2M5AP in one month of 25℃ room temperature condition.

During the stress experiments of method validation, when the sample solutions were added strong acid, H2O2 or illuminating UV light, the contents of ingredients, PAP、TDS及2M5AP, were all above 88.5% that was showed quite stable in these conditions. Nevertheless, the contents of PAP and 2M5AP in sample solution were severely decreased to 37.2% and 67.1% respectively during the addition of strong base. Besides, the content of PAP only in sample solution was obviously decreased to 62.4% during the test of heating.

目錄
中文摘要--------------------------------------------I
Abstract-----------------------------------------III
誌謝-----------------------------------------------V
目錄-----------------------------------------------VI
表目錄-------------------------------------------- IX
圖目錄---------------------------------------------XII
第壹章 前言----------------------------------------1
第一節、染髮的作用區---------------------------1
第二節、毛髮髮幹之構造-------------------------2
第三節、染髮劑的種類與特性----------------------2
第四節、永久性氧化型染髮劑在頭髮的顯色機轉---------4
第五節、對苯二胺(p-Phenylenediamine)對人體的影響-7
第貳章 研究目的-------------------------------------8
第參章 高效能液相層析儀原理----------------------------9
第肆章 實驗----------------------------------------15
一、 藥品----------------------------------------15
二、 儀器設備-------------------------------------17
三、 永久性氧化型染髮劑成份介紹----------------------18
四、 高效能液相層析儀分析條件建立---------------------29
五、 七個染髮劑常見的成份一個月下於25℃安定下測試--------35
六、 永久性氧化型染髮劑的製作------------------------36
七、 溶液的配製-----------------------------------38
1. 標準品的配製---------------------------------38
2. 樣品液的配製---------------------------------38
3. 空白試劑的配製-------------------------------38
八、 高效能液相層析儀分析確效------------------------39
1. 系統穩定------------------------------------39
2. 專一性--------------------------------------39
3. 精密度--------------------------------------40
4. 校正曲線------------------------------------40
5. 準確度--------------------------------------40
6. 偵測極限、定量極限-----------------------------41
7. 分離因子與理論板數的計算------------------------41
8. 理論板數的計算--------------------------------41
第伍章 結果與討論------------------------------------42
一、 高效能液相層析儀方法確效-------------------------42
1. 系統穩定性------------------------------------------42
2. 專一性---------------------------------------------44
3. 精密度---------------------------------------------49
4. 校正曲線--------------------------------------------60
5. 準確度---------------------------------------------63
6. 偵測極限與定量極限------------------------------------64
7. 分離因子與理論板數的計算-------------------------------64
二、 自製永久性氧化型染髮劑的成分安定性------------------65
三、 自製永久性氧化型染髮劑的外觀顏色--------------------66
四、 自製永久性氧化型染髮劑對白色頭髮試染測試--------------66
第陸章 結論-----------------------------------67
第柒章 參考文獻--------------------------------69

表目錄
表1. 氧化型染髮劑主要成分與耦合劑反應產生染色大分子---------6
表2. 正相層析與逆相層析之特性比較------------------------12
表3. 不同尺寸應用需求之管柱尺寸---------------------------13
表4. 各種型層析管及其官能基-----------------------------13
表5. 本實驗最適當之HPLC分析條件-------------------------34
表6. 七個常見染髮劑成分的滯留因子、解析度與理論板數----------34
表7. 40ppm染料成份在25℃時的安定性數據---------------------35
表8. 含6.5% Na2SO3自製的永久性氧化型染髮劑-----------------36
表9. 行政院衛生署食品藥物管理局限量(%)與自製永久性氧化型染髮劑含
(%)----------------------------------------------37
表10. 系統穩定40 ppm PAP六重複注射結果數據-----------------42
表11. 系統穩定40 ppm TDS六重複注射結果數據-----------------43
表12. 系統穩定40 ppm 2M5AP六重複注射結果數據---------------43
表13. TDS、PAP及2M5AP標準品與樣品滯留時間------------------44
表14. 破壞性試驗的波峰面積數據-------------------------------49
表15. PAP標準品次與次間重複性的層析數據表--------------------51
表16. TDS標準品次與次間重複性的層析數據表---------------------51
表17. 2M5AP標準品次與次間重複性的層析數據表------------------52
表18. PAP標準品日與日間再現性第一天的層析數據表---------------53
表19. TDS標準品日與日間再現性第一天的層析數據表-----------------54
表20. 2M5AP標準品日與日間再現性第一天的層析數據表-------------54
表21. PAP標準品日與日間再現性第二天的層析數據表---------------56
表22. TDS標準品日與日間再現性第二天的層析數據表----------------56
表23. 2M5AP標準品日與日間再現性第二天的層析數據表-------------57
表24. PAP標準品日與日間再現性第三天的層析數據表---------------58
表25. -TDS標準品日與日間再現性第三天的層析數據表---------------59
表26. 2M5AP標準品日與日間再現性第三天的層析數據表-------------59
表27. PAP標準品檢量線三重複的數據--------------------------60
表28. TDS標準品檢量線三重複的數據---------------------------61
表29. 2M5AP標準品檢量線三重複的數據------------------------61
表30. PAP回收率數據-------------------------------------63
表31. TDS回收率數據-------------------------------------63
表32. 2M5AP回收率數據-----------------------------------64
表33. 分析主成分的偵測極限與定量極限------------------------64
表34. 分析主成分的滯留因子與理論板數------------------------64
表35. 自製染劑在25℃時的安定性數據----------------------------65
表36. 自製永久性氧化型染髮劑在25℃環境下，1個月的顏色及外觀變化----66


圖目錄
圖1. 染髮的作用區---------------------------------------1
圖2. 氧化型染髮劑中間體 p-Phenylenediamine 與不同偶合劑 Resorcinol、p-Amino-o-cresol 或 m-Phenylenediamine 進行氧化反應----5
圖3. 高效能液相層析儀儀器---------------------------------9
圖4. PPD標準品之UV吸收圖--------------------------------30
圖5. PAP標準品之UV吸收圖---------------------------------30
圖6. TDS標準品之UV吸收圖--------------------------------30
圖7. MAP標準品之UV吸收圖----------------------------------31
圖8. OAP標準品之UV吸收圖--------------------------------31
圖9. RL標準品之UV吸收圖---------------------------------31
圖10. 2M5AP標準品之UV吸收圖------------------------------32
圖 11. 40 ppm 標準品(PPD、PAP、TDS、MAP、RL、OAP及2M5AP)之層析圖譜-------------------------------------------------------32
圖12. 解析度示意圖---------------------------------------33
圖13. 自製永久染劑成型圖----------------------------------37
圖 14. 32 ppm PAP、32 ppm TDS及34 ppm 2M5AP標準品之層譜----46
圖 15. 32ppm PAP、32 ppm TDS及34 ppm 2M5AP樣品之層析圖譜---46
圖16.（A）未經過任何破壞之樣品液之層析圖譜----------------------46
圖17.（B）加熱破壞之樣品液之層析圖譜--------------------------47
圖18.（C）酸化破壞之樣品液之層析圖譜---------------------------47
圖19.（D）鹼化破壞之樣品液之層析圖譜---------------------------48
圖20.（E）氧化破壞之樣品液之層析圖譜---------------------------48
圖21.（F）照射破壞之樣品液之層析圖譜---------------------------49
圖22. PAP、TDS及2M5AP標準品次與次間重複性之層析圖疊圖---------50
圖23. PAP、TDS及2M5AP標準品日與日間再現性之第一天層析圖疊圖----53
圖24. PAP、TDS及2M5AP標準品日與日間再現性之第二天層析圖疊圖----55
圖25. PAP、TDS及2M5AP標準品日與日間再現性之第三天層析圖疊圖------58
圖26. PAP標準品三重複注射的檢量線--------------------------62
圖27. TDS 標準品三重複注射的檢量線-------------------------62
圖28. 2M5AP 標準品三重複注射的檢量線-----------------------62
圖29. 自製染劑在25℃時的安定性數據--------------------------65
圖30. 未染前的白頭髮 -----------------------------------66
圖31. 染後的白頭髮---------------------------------------66

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